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RAA技术检测手足口病致病病毒
发布时间:2018-07-30 09:28:35         阅读量:3245         来源:未知        

手足口病是由肠道病毒引起的传染病,多发生于5岁以下儿童,多数患儿一周左右即可自愈,少数患儿中可见心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症。个别重症患儿病情发展快,甚至可能导致死亡。目前仍缺乏有效的对症治疗药物。

常见手足口病症状

引发手足口病的肠道病毒有20多种(型),其中以柯萨奇病毒A16型(CVA16)和肠道病毒71型(EV 71)最为常见。近年来,逐渐出现了其他能导致手足口病的肠道病毒,其中,肠道病毒CVA6和CVA10引发的手足口病病例比例呈逐年上升趋势,这引起了研究人员的高度关注。据统计,在2008年,由CVA6和CVA10引发的手足口病比例达到35.5%。研究表明,在中国、法国、芬兰和西班牙,CVA6和CVA10是引起手足口病的主要病原体。

肠道病毒A6(CVA6)的三维结构

检测病原体的传统方法主要是病毒培养和中和试验,然而这些方法不仅操作步骤复杂,而且比较耗时。包含PCR分析和等温核酸扩增分析在内的分子诊断方法则在一定程度上弥补了传统检测方法的缺陷。当然,分子诊断方法也有自己的局限性,比如RT-PCR(逆转录PCR)需要昂贵的仪器和专业操作人员支持,而LAMP(环介导等温扩增技术)则需要至少四条引物,且引物设计非常复杂。

和上述方法相比,RAA技术无疑是一种更好的选择。RAA(Recombinase-Aided Amplification)技术一方面是一种等温核酸扩增技术,整个反应过程在37~39℃下进行,不需要昂贵的变温设备,另一方面,该方法的引物设计简单,和PCR类似,只需要2条,集中体现了分子诊断方法的全部优势。

中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所中心实验室马学军团队,使用奇天基因的RAA荧光基础试剂盒,建立了检测CVA6和CVA10的方法,该方法灵敏、特异、快速,在检测CVA6和CVA10方面有着良好的应用前景。具体研究情况参见原文。